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重點實驗室

重點實驗室

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重點實驗室

遼寧省實驗動物模型重點實驗室是遼寧省科技廳2013年設置的省重點實驗室,經過多年的建設,已建成集模式生物研發、生產和動物實驗服務三位一體的綜合性服務平臺。提供常規轉基因、常規基因敲除、條件型基因敲除和基于CAS9技術的基因編輯小鼠、倉鼠等臨床模式動物制備服務以及動物代繁代養服務等。

 


 

基因修飾動物模型

 

1、轉基因制作

 

轉基因是將外源DNA通過顯微注射的方法注射到小鼠受精卵的原核內,注射DNA整合到受精卵的基因組中,并遺傳給后代。

 

2、基因敲除(KO)

 

用大小鼠基因特異sgRNA(single-guide RNA)介導Cas9核酸酶切割DNA出現特定的DSBs( double-stranded breaks),通過NHEJ(nonhomologous end joining)修復途徑造成靶基因的Indel ( insertion/deletion),產生移碼突變(frameshift mutations)、翻譯提前終止(premature stop codon)或者片段刪除,從而實現基因敲除。成功率高達100%,且不受品系限制,可以實現多基因同時敲除。

 

3. 基因敲入(KI)

 

(1) 特定位點寡核苷酸突變

在小鼠基因組中的特定位點敲入突變,包括單個或多個堿基突變、單個或多個氨基酸突變等。

(2)  特定位點基因敲入

在小鼠基因組中的特定位點敲入異源基因,如:熒光蛋白,LacZ,Luciferase,CreERT2,LoxP-GFP-stop-LoxP-RFP等。

 

4. 條件性基因敲除(CKO)

 

條件性基因敲除是通過Cre-LoxP/FLP-Frt重組系統來實現的。在目的基因兩端各放置一個LoxP序列,得到Floxed小鼠。將Floxed小鼠與Cre小鼠交配,即可獲得目的小鼠。

 

5. 誘導性點突變制作

 

利用Cre重組酶介導的刪除和倒位,可以實現目的基因的誘導性點突變。

 


 

動物模型

 

小鼠品系模型 地鼠品系模型 人源腫瘤異種移植模型
TP53小鼠模型 AS160地鼠模型 胃癌移植瘤NYG小 鼠模型
APOE小鼠模型 PRKDC D140地鼠模型 肺癌移植瘤NYG小鼠模型
LDLR小鼠模型 NOS3地鼠模型 肝癌移植瘤NYG小鼠模型
NEO小鼠模型 PCSK9 D22地鼠模型 食道癌移植瘤NYG小鼠模型
AS160小鼠模型 PCSK9 D380Y地鼠模行 胰腺癌移植瘤NYG小鼠模型
ACE2小鼠模型 MIR223地鼠模型 結直腸癌移植瘤NYG小鼠模型
NYG D10-D50小鼠模型 Leptin地鼠模型  
APP/PS1小鼠模型 LDLR APOE和LDLRMUT717地鼠模型  
NOD SCID與NYG以及NYG D10-D50與NYG小鼠模型
   

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 


 

模型制備

 

藥物誘導模型 手術誘導模型 轉基因模型
肺纖維化模型(氣管給藥) 腦缺血再灌注模型(頸動脈結扎法) 基因工程小鼠制備(顯微注射)
慢性心衰模型(注射給藥) 大腦中動脈栓塞和缺血再灌注模型(線拴法) 模型小鼠保種(活體/胚胎冷凍)
帕金森/癲癇模型(腦立體定位法) 心肌梗死模型(開胸法) 模型小鼠代養與擴繁(體外受精擴繁)
哮喘模型(霧化法) 坐骨神經鉗夾和離斷模型  
腫瘤皮下成瘤模型(皮下注射法) 脊髓損傷模型(打擊器法)  
腫瘤PDX模型(組織塊移植) 腎缺血再灌注模型(腎動脈結扎法)  
潰瘍性結腸炎模型 骨質疏松模型(卵巢摘除法)  
妊娠糖尿病模型 肝纖維化/肝硬化模型(膽總管結扎法)  
類風濕關節炎動物模型 膿毒血癥模型(盲腸結扎穿刺法)  
糖尿病腎病模型 血管內皮損傷模型(球囊/導絲法)  

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 


 

 

干細胞及免疫細胞
 
間充質干細胞分離、鑒定、培養、分化及各種疾病研究
 
免疫細胞分離、誘導培養、鑒定及各種疾病研究

 

 


 

 

細胞功能學

 

細胞活性檢測、細胞增殖檢測、細胞凋亡檢測、細胞周期檢測、細胞自噬檢測、細胞壞死檢測、細胞焦亡檢測、細胞鐵死亡檢測、細胞遷移能力檢測、細胞劃痕檢測、細胞黏附能力檢測、細胞侵襲能力檢測、細胞免疫化學染色、細胞免疫熒光染色、細胞RNAscope實驗、細胞線粒體自噬檢測、細胞內質網應激檢測、細胞熒光原位雜交(FISH)實驗。

 

 


 

分子生物學

 

DNA提取、DNA甲基化、基因多態性檢測、轉錄因子功能及調控

RNA提取、RNA甲基化、lncRNA表達及調控、circRNA表達及調控、miRNA加尾法PCR、miRNA莖環法PCR

載體構建、病毒制備、雙熒光素酶實驗、EMSA實驗、RNA pull-down、RNA免疫共沉淀(RIP)、染色質免疫共沉淀(CHIP)

蛋白提取、蛋白修飾檢測、蛋白活性分析、免疫共沉淀

Western 雜交、Southern 雜交、Northern 雜交、定量RT-PCR檢測

 

 


 

病理形態

 

普通病理:脫鈣與軟化、標本包埋、切片、HE染色、特殊染色

分子病理:免疫組化、免疫熒光、TUNEL、原位雜交

病理圖像:切片掃描、共聚焦、拍照分析、三維重建、AI病理分析

超微病理:透射電鏡、掃描電鏡能譜、電鏡分析、免疫電鏡

 

 


 
 
多組學研究
 
高通量測序
蛋白質組
代謝組
 
 
 

 
 
磁納米粒子及精密磁檢測技術
 
磁粒子成像

 

免洗型磁標記免疫分析

 

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